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编号:13176246
酶解栀子苷制备苷元的正交试验研究(2)
http://www.100md.com 2012年11月1日 《中国中药杂志》 2012年第21期
     2.3.2 栀子苷及苷元色谱分析方法 采用外标两点法测试酶解液中苷元浓度。色谱条件:Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱(0~15 min,10%~18%乙腈;15~20 min,18%~25%乙腈);进样量10 μL;柱温30 ℃;检测波长238 nm;流速1 mL·min-1。色谱图见图1。

    2.3.3 不同酶栀子苷水解效果测定 将3组试液放于50 ℃,100 r·min-1摇床内反应若干小时后,取样稀释,液相检测,测算样品液中栀子苷元浓度,结果见表2。3种测试酶类对于栀子苷水解生成苷元效果由优至劣依次为β-葡萄糖苷酶、果胶酶、啤酒复合酶,因此选用β-葡萄糖苷酶开展水解栀子苷的正交研究。

    2.3.4 正交试验样品测定 经液相检测,测算样品原液中栀子苷元的浓度,结果见表3,4。

    结果显示,影响栀子苷酶解制备苷元得率的因素次序为C > A > D > B。综合比较各水平,最佳反应条件是A2B2C2D2 ......
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