采用高效液相色谱法测定环孢素的含量[4]。色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相为乙腈-水-磷酸溶液(73 ∶ 27 ∶ 0.25，V/V/V);检测波长为226 nm;柱温为60 ℃;流速为1.0 mL/min;进样量为20 μL。在该色谱条件下，供试品(A厂家，2%SDS的模拟胃液，15 min取样)及对照品色谱图见图1。

    2.3 方法学考察

    2.3.1 线性关系考察 精密量取“2.1.3”项下对照品贮备液0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL稀释至100 mL，按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以环孢素质量浓度(μg/mL)为横坐标(x)、峰面积为纵坐标(y)进行线性回归，得环孢素在6种介质(含2%SDS的pH 1.2盐酸溶液、含2%SDS的水溶液、含2%SDS的pH 4.5 醋酸盐缓冲溶液、含2%SDS的pH 5.5醋酸盐缓冲溶液、含2%SDS的pH 6.8 磷酸盐缓冲溶液、含2%SDS的模拟胃液)中的回归方程分别为y=1.405 7×105x+3.032 6×104(r=0.999 9)、y=1.612 2×105x+2.124 7×104(r=0.999 8)、y=1.538 1×105x-1.192 6×104(r=0.999 7)、y=1.723 9×105x+2.814 5×104(r=0.999 6)、y=1.667 8×105x+3.221 7×104(r=0.999 8)、y=1.586 9×105x+3.341 8×104(r= 0.999 9) ......